在细胞培养过程中,细胞之间出现交叉污染的现象并不罕见,这通常是由于操作时多种细胞同时进行、混杂使用器皿和液体所引起。这种污染对细胞的生长特性和形态特征产生影响,某些变化可能较轻微且不易察觉,但有时污染细胞可能具有生长优势,从而抑制原有细胞的生长,最终导致细胞死亡。为了检测交叉污染的细胞,通常采用的措施包括观察细胞的形态、分析其生长特性和核型、以及检测细胞的标记物等。
为了有效解决细胞培养过程中的污染问题,可以参照以下建议:首先,细胞培养所需的器具和材料必须进行彻底的清洗和消毒,确保所有溶液在使用前经过仔细灭菌并在采样检菌一周后确认无菌才能使用。同时,在进行无菌过滤时,要特别注意由于滤过体积的增大,滤膜可能会破损,因此最好选择最后过滤的液体进行检测。
其次,定期对二氧化碳培养箱进行消毒是十分必要的。具体操作方法包括使用75%的酒精擦拭培养箱表面,然后使用可移动的紫外灯进行至少30分钟的消毒。此外,可以在培养箱水槽中加入经过高压灭菌的超纯水保持湿度,或者配制300ml的饱和硫酸铜溶液加入水槽中。
在细胞培养过程中,添加适当的抗生素能够有效防止微生物的污染。不同的抗生素对微生物的作用机制各不相同,通常联合使用抗生素效果会更好。然而,为避免诱导抗药菌株的发生,建议定期更换培养系统中的抗生素,或尽可能减少抗生素的使用。
操控人员的细节同样至关重要。在进入无菌室前要彻底洗手,穿好专用的隔离衣;在操作前用75%酒精进行消毒,确保手部及器具无污染。操作时应尽量避免交谈和咳嗽,以防唾液或呼出的气流导致的污染。
细胞培养结束后,应立即清理工作台面,用消毒液浸泡过的纱布擦拭干净。此外,吸取培养液和细胞悬液时,需要专管专用,并在接触污染物时及时更换吸管以防止交叉污染。
如怀疑细胞发生交叉污染,应及时进行细胞遗传学方面的鉴定。一旦发现原有细胞的遗传物质发生改变,可以通过复苏早期冻存的细胞恢复实验进程。对于重要的细胞系传代工作,建议由两人独立完成以降低风险。
通过采取以上多项措施,我们可以有效降低细胞培养中的交叉污染风险,为后续的生物医疗研究提供更可靠的基础。Z6·尊龙凯时致力于为科研工作者提供优质的实验环境,确保细胞培养过程的高效和安全。