ELISA，即酶联免疫吸附试验（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay），是生物医学领域中一种广泛使用的免疫检测方法，它能高效地检测和定量特定蛋白质或其他生物分子。该技术依赖于抗原与抗体之间的特异性结合，利用酶催化反应来放大信号，从而实现对目标分子高灵敏度的检测。为了确保实验结果的准确性与可靠性，进行ELISA检测时，需要严格遵循质量控制程序，并在样本收集前制定详细的计划。

一、ELISA样本的处理

在ELISA检测过程中，为了确保实验数据可靠，首先需要对样本进行妥善处理。以下是一些注意事项：

• 每个样本的收集体积应为100µl乘以检测种类；若进行复孔实验，则需按相应比例增加样本量。
• 如果样本计划在一周内检测，可将其在2-8°C下保存；若无法及时检测，建议将样本分装并冷冻保存于-20°C或-80°C，以避免反复冻融带来的影响。
• 检测范围应与样本中待测物的浓度范围相匹配，建议在实验前通过参考相关文献预估样本浓度，并进行预实验确定样本的合适性。
• 在采集血清样本时，务必避免溶血，因为红细胞裂解可能会释放具过氧化物酶活性的物质，导致非特异性显色的增加。
• 精确收集尿液样本也是确保检测准确的关键，必须使用干净干燥的无菌容器，最佳选择为一次性容器，以避免交叉污染。

二、标本类型

ELISA常用的标本主要包括以下几类：

• 液体标本：如血清、血浆、尿液、细胞上清和脑脊液等。
• 组织标本：切割后与PBS混合，迅速冷冻保存，以备后续检测。

三、标本的保存与处理

一般情况下，血清标本在5天内可储存于4°C，超过一周需转存于-20°C。在冷冻后，标本在解冻时应充分混匀，避免蛋白质的局部浓缩。对于浑浊或有沉淀的血清标本，须先进行离心或过滤。

需要多次检测的抗体血清样本应分装后冷冻保存。此外，采集样本时应保持无菌操作，避免使用凝血剂，因其可能导致假阳性结果。

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